Высокоактивная щелочная фосфатаза

Высокоактивная щелочная фосфатаза

Рекомбинантная высокоактивная щелочная фосфатаза морской бактерии Cobetia marina

Описание. Рекомбинантная высокоактивная щелочная фосфатаза морской бактерии Cobetia marina. Мономер с молекулярной массой 55 кДа. Эффективно дефосфолирирует вектор перед лигированием, также способен дефосфорилировать различные субстраты, содержащие фосфатную группу, доступную для фермента. Мономер ЩФ Cobetia marina, в отличие от других щелочных фосфатаз мировых производителей, является инструментом для получения плазмид-реперов. На фоне очень высокой активности выступает как более мощный инструмент для получения иммуноконьюгатов, для получения рекомбинантных диагностических антител к клеточным рецепторам (реперных белков), дефосфолирирования ДНК перед лигированием и белков, а также более легко и быстро выводится из реакции прогреванием.

Источник. Фермент очищен до индивидуального состояния из рекомбинантного штамма E. сoli.

Условия хранения. В буфере 50 мМ трис-HCl (pH 8,5), 100 мМ NaCl, 0,01 % NaN3 при – 20 °C. Препарат стабилен как минимум 1 год.

Удельная активность – 3 800 ед/мг (в буфере трис-HCl, pH ~ 10)

                                – 13 000 ед/мг (в буфере диэтаноламин(ДЭА), pH 10,3)

За 1 единицу активности принимали количество фермента, необходимого для образования 1мМ пара-нитрофенола (пНФ) из пара-нитрофенилфосфата (п-НФФ) за 1 мин при 37 °C.

Условия реакции. 100 мМ трис-HCl, 0,2M KCl (pH ~ 10) или 1 М диэтаноламин (pH 10,3) при 37 °C. Препарат также проявляет 3-25 % активности при значениях pH от 6 до 11 в ацетатном, карбонатном и глициновом буферах и при температурах от 5 до 50 °C.

Удаление из реакции. Щелочная фосфатаза полностью денатурирует при прогревании в течение 10 мин при 65 °C.

Концентрация. 0,25 мг/мл (по методу Бредфорда)

                       1 ед / мкл (в буфере трис-HCl, pH ~ 10)

                       3 ед / мкл (в буфере диэтаноламин(ДЭА), pH 10,3)

Буферы для разбавления: A. 50 мМ трис-HCl (pH 8,5)
                                         B. 100 мМ трис-HCl (pH ~ 10), 0,2 M KCl
                                         C. 1 M диэтаноламин (pH 10,3)



Информация об инновационной продукции института:

Помощник по продвижению инновационной продукции 
и взаимодействию с бизнесом

Иващенко Вера Фёдоровна
Моб. Тел.: +7 914 322 10 92 (Пожалуйста, обратите внимание, что когда в Москве 10-00, во Владивостоке 17-00)  
эл. почта: mik@piboc.dvo.ru